蛋白是生命活動的體現(xiàn)者，因此，只有獲取具有正確構(gòu)象和功能的重組蛋白才能進行后續(xù)的生命科學研究。
采用大腸桿菌E.coli表達體系是獲取重組蛋白最重要的手段之一，該方法具有操作方便、成本低，而且重組蛋白含量較高等優(yōu)點。獲取的該蛋白適用于抗體制備、功能分析、細胞實驗以及蛋白相互作用研究等優(yōu)點。當然，該方法獲取的重組蛋白容易形成包涵體、需要復性以及缺乏蛋白后續(xù)修飾等缺點。
基本流程
技術(shù)優(yōu)勢
本公司擁有多種原核表達載體系統(tǒng)，pET系統(tǒng)（pET21、pET28、pET32以及pET41等）（含6×HIS Tag）；pGEX系統(tǒng)（pGEX-4T-1和pGEX-4T-1）（含GST Tag）；以及改良過的pCold冷休克的表達體系，根據(jù)實際需要選擇合適的載體，這對于減少包涵體的形成，提高重組蛋白的可溶性非常關(guān)鍵。
本公司擁有至少7種原核表達宿主菌，常規(guī)的E.coli BL21（DE3）、Rosetta、Origami、Arctic Express等，有些宿主菌非常有效的適用于超低溫環(huán)境下原核蛋白的穩(wěn)定和可溶性表達，這對于蛋白功能研究非常關(guān)鍵。
客戶須知：
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原核蛋白表達及功能分析
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周期 |
最終提供客戶資料 |
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原核蛋白表達及功能分析
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20-30個工作日，視樣品和基因數(shù)目而定。 |
詳細實驗總結(jié)報告（包括CDS克隆、載體構(gòu)建、測序、總蛋白分析、Western blot鑒定、表達部位分析、純化等）。
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案例：
本實驗在對某昆蟲中分子伴侶基因進行原核表達，采用pET32表達系統(tǒng)，同時采用低溫（13℃）環(huán)境下進行該基因的誘導表達，獲取更多的可溶性蛋白，同時進行純化和蛋白功能
分析，部分結(jié)果如下：
鞭毛蛋白與TLR5胞外區(qū)相互作用的PAGE檢測
客戶提供：
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樣品類型 |
常見物種（Rat、Mouse和Human） |
其他物種 |
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樣品需要量 |
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取樣和保存環(huán)境 |
只需提供NCBI基因序列號 |
提供組織、細胞以及準確的CDS序列。
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運輸 |
杭州市內(nèi)干冰上門取樣； 外地客戶干冰快遞運輸； 組織保存液，冰袋運輸 |
杭州市內(nèi)干冰上門取樣； 外地客戶干冰快遞運輸；
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*（經(jīng)本公司評估后，實驗沒有結(jié)果，不收取任何費用）
0571-86913236
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